T/NAIA 0376-2025 牛奶和奶粉中22种磺胺类残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

以下是对团体标准 ​​T/NAIA 0376-2025《牛奶和奶粉中22种磺胺类残留量的测定液相色谱-串联质谱法》​​ 的详细总结：

​​一、标准基本信息​​

• ​​标准名称​​：牛奶和奶粉中22种磺胺类残留量的测定液相色谱-串联质谱法
• ​​标准号​​：T/NAIA 0376-2025
• ​​归口单位​​：宁夏化学分析测试协会
• ​​起草单位​​：
  • 宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室）
  • 宁夏计量质量检验检测研究院
  • 宁夏化学分析测试协会

​​二、适用范围​​

1. ​​检测对象​​：牛奶、奶粉。
2. ​​目标物​​：22种磺胺类抗生素及其增效剂（甲氧苄啶），包括：
   • 磺胺醋酰（SAA）、磺胺苯酰（SBA）、磺胺氯哒嗪（SCP）、磺胺二甲基嘧啶（SDM）、磺胺地索辛（SDT）、磺胺多辛（SDX）、磺胺嘧啶（SDZ）、磺胺异恶唑（SFZ）、磺胺脒（SGN）、磺胺索嘧啶（SIM）、磺胺对甲氧嘧啶（SMD）、磺胺间甲氧嘧啶（SMM）、磺胺二甲唑（SMO）、磺胺甲氧嗪（SMP）、磺胺甲嘧啶（SMR）、磺胺甲噻二唑（SMT）、磺胺甲恶唑（SMZ）、磺胺苯吡唑（SPA）、磺胺吡啶（SPD）、磺胺喹恶啉（SQX）、磺胺噻唑（STZ）、​​甲氧苄啶（TMP）​​。

​​三、方法原理​​

1. ​​提取​​：试样用 ​​1%甲酸乙腈溶液​​ 提取，加入氯化钠促进分层。
2. ​​净化​​：采用 ​​分散固相萃取（d-SPE）​​，使用 ​​C₁₈粉末（80mg）和PSA粉末（50mg）​​ 吸附杂质。
3. ​​检测​​：
   • ​​色谱分离​​：反相C₁₈色谱柱（2.1 mm × 150 mm, 3.5 μm），梯度洗脱（流动相：0.1%甲酸水 + 0.1%甲酸乙腈）。
   • ​​质谱检测​​：电喷雾离子源（ESI⁺），多反应监测（MRM）模式，外标法定量。

​​四、关键实验步骤​​

​​1. 样品前处理​​

• ​​牛奶​​：取5g样品，加10g NaCl和10mL 1%甲酸乙腈，涡旋、离心，重复提取。
• ​​奶粉​​：取1g样品，同法处理。
• ​​净化​​：取10mL上清液，加入C₁₈和PSA粉末净化，氮吹浓缩后复溶。

​​2. 仪器条件​​

• ​​液相色谱​​：
  • 流速0.3 mL/min，柱温30℃，进样量5μL。
  • ​​梯度程序​​：0–3min（90% A）→ 8min（30% A）→ 12min（10% A）→ 15min（90% A）。
• ​​质谱​​：
  • 离子源温度375℃，雾化气压力310 kPa，毛细管电压3000 V。
  • 各目标物的母离子、子离子、碎裂电压（70–130 V）、碰撞能量（5–32 eV）详见附录B。

​​五、定性定量方法​​

1. ​​定性确证​​：
   • 保留时间偏差 ≤ ±2.5%
   • 离子丰度比偏差符合表2要求（如＞50%时允许±20%偏差）。
2. ​​定量计算​​：
   • 外标法，基质匹配标准曲线（浓度范围：0.2–20.0 ng/mL）。
   • ​​计算公式​​：

     X = /frac{C /times V /times 1000}{m /times 1000} /times f

     • X：残留量（μg/kg）；
     • C：试样浓度（ng/mL）；
     • V：定容体积（mL）；
     • m：试样质量（g）；
     • f：稀释倍数。

​​六、方法性能指标​​

1. ​​定量限（LOQ）​​：全部22种目标物均为 ​​1.0 μg/kg​​。
2. ​​精密度​​：平行测定结果的绝对差值 ≤ 算术平均值的 ​​10%​​。

​​七、附录内容​​

• ​​附录A​​：22种磺胺的标准品信息（名称、分子式、CAS号、纯度）。
• ​​附录B​​：质谱参数表（母离子、子离子、碎裂电压、碰撞能量）。
• ​​附录C​​：22种磺胺的定量离子对典型色谱图（未提供图示）。

​​八、注意事项​​

1. ​​标准品贮存​​：
   • 单标储备液（1.0 mg/mL）：避光冷冻保存（有效期3个月）。
   • 混标储备液（10.0 μg/mL）：避光冷冻保存（有效期1个月）。
2. ​​空白试验​​：每批次样品需同步进行空白对照。
3. ​​专利声明​​：标准可能涉及专利，发布机构不承担识别责任。

​​总结​​

本标准建立了牛奶和奶粉中22种磺胺类药物的 ​​HPLC-MS/MS 检测方法​​，通过 ​​1%甲酸乙腈提取​​ 和 ​​C₁₈/PSA 分散固相萃取净化​​，结合 ​​梯度洗脱色谱分离​​ 与 ​​多反应监测质谱扫描​​，实现高灵敏度（LOQ=1.0 μg/kg）、高精密度（RSD≤10%）的定量分析，适用于乳制品中磺胺残留的日常监测。