鸡红螨病诊断技术规范(T/CVMA 230-2025)详细总结

一、标准基本信息

1. ​​标准编号​​：T/CVMA 230-2025
2. ​​英文名称​​：Diagnostic techniques specification for poultry red mite disease
3. ​​归口单位​​：中国兽医协会
4. ​​提出单位​​：河南农业大学
5. ​​起草单位​​：河南农业大学、中国动物卫生与流行病学中心、中国农业大学等多家机构
6. ​​适用范围​​：适用于鸡红螨病的临床诊断及病原鉴定

二、术语定义

1. ​​鸡红螨(Poultry red mite)​​：节肢动物门、蛛形纲、蜱蜱螨目、皮刺螨科、皮刺螨属的寄生虫，寄生于鸡、鸽等多种禽类体外
2. ​​鸡红螨病​​：由鸡皮刺螨寄生引起的体外寄生虫病，主要症状包括皮肤红肿、损伤、炎症以及贫血、消瘦等

三、诊断方法体系

1. 临床诊断

• ​​临床症状​​：
  • 羽毛脱落、啄毛
  • 瘙痒不安、夜间惊叫
  • 皮肤红疹和损伤
  • 贫血、消瘦、产蛋量下降
• ​​病理变化​​：叮咬处皮肤红疹、损伤或结痂
• ​​流行病学​​：多发于笼养蛋鸡，7-9月高温潮湿季节易发

2. 显微镜检查

• ​​标本制备​​：甘油制片法
• ​​形态特征​​：
  • 体长0.45-1.45mm(饱血后可达1.5mm)
  • 褐色/棕黑色/淡黄色(饱血后红黑色)
  • 长椭圆形，体表短绒毛
  • 4对足(幼虫3对)
  • 针状螯肢和须肢

3. PCR检测技术

• ​​靶基因​​：
  • 18S rRNA/ITS/28S rRNA(519bp)
  • 线粒体Cox1基因(453bp)
• ​​反应体系​​：50μL体系，含KOD-plus酶
• ​​反应程序​​：35个循环(94℃ 30s→54℃ 30s→72℃ 1min)
• ​​结果判定​​：
  • 阳性：出现519bp或453bp条带
  • 阴性：无特异性条带

四、综合判定标准

1. ​​阳性判定​​：
   • 形态符合且PCR阳性
   • 或PCR重复检测阳性(即使形态不符)
2. ​​阴性判定​​：
   • 形态不符且PCR阴性
   • 或PCR重复检测阴性(即使形态疑似)

五、生物安全要求

1. ​​采样防护​​：需穿戴手套、口罩、工作服，使用驱避剂
2. ​​实验室级别​​：BSL-1级实验室操作
3. ​​样品处理​​：按GB/T 27401规范处理

六、附录内容

1. ​​溶液配制​​：TAE缓冲液、琼脂糖凝胶配方
2. ​​引物序列​​：
   • 18S-28S引物对
   • Cox1引物对
3. ​​参考序列​​：提供GenBank登录号(LC034922.1和OQ876771.1)

该标准系统规范了从临床诊断到实验室确认的完整技术流程，为鸡红螨病的准确诊断提供了标准化方法，特别强调了形态学与分子生物学的联合判定原则，确保诊断结果的可靠性。