T/NAIA 0367-2025 葡萄和葡萄酒中9种氨基甲酸酯类农药残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法

以下是T/NAIA 0367-2025标准《葡萄和葡萄酒中9种氨基甲酸酯类农药残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法》的详细内容总结：

​​1. 范围​​

• ​​适用对象​​：葡萄及葡萄酒。
• ​​目标物​​：9种氨基甲酸酯类农药，包括：
  灭多威、异丙威、甲萘威（甲萘萘威）、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、克百威、恶虫威、灭定威。
• ​​方法​​：高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。

​​2. 规范性引用文件​​

• ​​关键标准​​：
  • GB 2763《食品中农药最大残留限量》
  • GB/T 6682《分析实验室用水规格和实验方法》

​​3. 原理​​

• ​​提取​​：样品经乙腈涡旋振荡提取。
• ​​净化​​：提取液经分散固相萃取（dSPE）净化（吸附剂组合：无水硫酸镁 + PSA + GCB）。
• ​​检测​​：LC-MS/MS分析，外标法定量。

​​4. 试剂与材料​​

• ​​主要试剂​​：
  • 乙腈（色谱纯）、甲酸（色谱纯）、氯化钠、无水硫酸镁粉末（50 μm）、PSA粉末（50 μm）、柠檬酸二钠盐、石墨化碳黑（GCB, 60 μm）。
  • 溶液配制：0.1%甲酸水溶液、0.1%甲酸乙腈溶液。
• ​​标准品​​：9种农药标准物质（CAS号及分子式见附录A）。
• ​​标准溶液配制​​：
  • 混合储备液（10 μg/mL）：由1.0 mg/mL单标配制。
  • 混合中间液（1.0 μg/mL）：稀释储备液。
  • 基质标准工作液（1–100 ng/mL）：用空白基质配制，临用现配。

​​5. 仪器设备​​

• ​​核心设备​​：
  • 高效液相色谱-串联质谱仪（ESI离子源）。
• ​​辅助设备​​：
  • 分析天平（0.01 g）、涡旋混合器、离心机（≥8000 r/min）、高速匀浆机（≥10000 r/min）、0.22 μm有机微孔滤膜。

​​6. 分析步骤​​

​​(1) 试样制备​​

• ​​葡萄​​：按GB 2763制成匀浆，-18°C保存。
• ​​葡萄酒​​：摇匀后直接分装，-18°C保存。

​​(2) 提取与净化​​

• ​​葡萄​​：
  • 称取2 g样品 + 10 mL乙腈 + 4 g无水MgSO₄ + 1 g NaCl + 0.5 g柠檬酸二钠盐。
  • 涡旋3 min → 离心（8000 r/min, 3 min）。
  • 取2 mL上清液 + 900 mg MgSO₄ + 150 mg PSA + 15 mg GCB → 涡旋2 min → 离心（8000 r/min, 5 min）→ 滤膜过滤。
• ​​葡萄酒​​：
  • 取10 mL样品 + 10 mL乙腈 + 8 g MgSO₄ + 2 g NaCl + 0.5 g柠檬酸二钠盐。
  • 后续步骤同葡萄样品。

​​(3) 仪器条件​​

• ​​液相色谱（LC）​​：
  • 色谱柱：C₁₈柱（2.1 mm × 100 mm, 3.5 μm）。
  • 流动相：
    • A：0.1%甲酸水溶液
    • B：0.1%甲酸乙腈溶液
  • 梯度洗脱程序（8 min内完成）：

    时间(min)	A%	B%
    0.00	80	20
    1.00	80	20
    5.00	20	80
    5.01	10	90
    6.00	10	90
    6.01	80	20
    8.00	80	20

  • 流速：0.3 mL/min；柱温：30℃；进样量：5 μL。
• ​​质谱（MS）​​：
  • 离子源：电喷雾（ESI⁺）；扫描模式：多反应监测（MRM）。
  • 关键参数：
    • 鞘气温度：325℃；鞘气流速：7.0 L/min；
    • 雾化气压力：45 psi；毛细管电压：3500 V。
  • ​​各农药质谱参数​​（详见附录B）：

    农药名称	母离子(m/z)	定量子离子(m/z)	碎裂电压(V)	碰撞能量(eV)
    灭多威	163.0	88.0*	40	7
    异丙威	194.1	95.1*	50	5
    ...（其他7种）	...	...	...	...

​​(4) 定性定量​​

• ​​定性​​：保留时间一致，离子丰度比偏差符合表2要求（±20%~±50%）。
• ​​定量​​：基质标准曲线外标法。

​​(5) 空白试验​​：不加样品，同步操作。

​​7. 结果计算​​

• ​​公式​​：

  X = /frac{C /times V /times 1000}{m /times 1000} /quad (/text{μg/kg 或 μg/L})

  • X：残留量；
  • C：试样浓度（ng/mL）；
  • V：提取液体积（mL）；
  • m：试样质量（g）或体积（葡萄酒按密度≈1 g/mL计）。
• ​​报告​​：平行测定均值，保留三位有效数字。

​​8. 方法性能指标​​

• ​​精密度​​：平行结果相对偏差 ≤ 10%。
• ​​定量限（LOQ）​​：

  样品	农药	LOQ
  葡萄	9种	5.0 μg/kg
  葡萄酒	9种	3.0 μg/L

​​9. 附录内容​​

• ​​附录A​​：9种农药信息表（中英文名、CAS号、分子式）。
• ​​附录B​​：质谱参数表（母离子、子离子、电压参数）。
• ​​附录C​​：9种农药定量离子对的典型色谱图（示例）。

​​关键创新点​​

1. ​​高效净化​​：PSA去除极性干扰物，GCB吸附色素，适用于深色基质（如葡萄）。
2. ​​快速分析​​：LC梯度洗脱仅需8分钟，提升检测效率。
3. ​​高灵敏度​​：LOQ低至μg/kg级，满足GB 2763限量要求。

此标准为宁夏食品检测研究院主导，适用于葡萄及葡萄酒中氨基甲酸酯类农药残留的精准监控，支撑食品安全监管与贸易合规性验证。