NY/T 4643-2025 蜂蜜中2-乙酰吠喃-3-葡萄糖苦的测定 高效液相色谱法

​​NY/T 4643-2025《蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的测定 高效液相色谱法》主要内容总结​​

​​1. 标准概述​​

• ​​标准名称​​：蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的测定高效液相色谱法。
• ​​适用范围​​：适用于蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的定量分析，方法检出限为0.5 mg/kg，定量限为1.0 mg/kg。
• ​​归口单位​​：全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC 274），由农业农村部畜牧兽医局提出。
• ​​起草单位​​：中国农业科学院蜜蜂研究所、云南省农业科学院蚕蜂研究所等。

​​2. 方法原理​​

• ​​提取​​：蜂蜜样品用水溶解，离心后过膜，提取目标化合物。
• ​​测定​​：采用高效液相色谱（HPLC）分离，紫外检测器（280 nm）检测，外标法定量。

​​3. 试剂与材料​​

• ​​关键试剂​​：
  • 一级水（GB/T 6682）、色谱纯甲醇。
  • ​​标准品​​：2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷（CAS: 85559-61-1，纯度≥95%），配制成1000 mg/L储备液（乙腈溶解），临用前稀释为0.5~100 mg/L系列标准溶液。
• ​​耗材​​：0.45 μm水系滤膜。

​​4. 仪器设备​​

• ​​主要设备​​：
  • 高效液相色谱仪（配紫外/二极管阵列检测器）。
  • 分析天平（精度0.01 mg）、高速冷冻离心机（≥10,000 r/min）、恒温水浴锅（±1℃）。

​​5. 样品处理​​

• ​​前处理​​：
  1. 蜂蜜样品需45℃水浴融化混匀，称取5 g用水定容至10 mL。
  2. 涡旋5 min，10,000 r/min离心5 min，上清液过膜后进样。

​​6. 色谱条件​​

• ​​色谱柱​​：C18柱（150 mm×2.1 mm，3.5 μm，耐100%水相）。
• ​​流动相​​：
  • A相：水；B相：甲醇。
  • ​​梯度程序​​（见表1）：初始99% A，15 min内调整至90% A，16 min切换至90% B，22 min后恢复初始比例。
• ​​其他参数​​：
  • 流速0.2 mL/min，柱温30℃，检测波长280 nm，进样量10 μL。

​​7. 定性与定量​​

• ​​定性​​：以保留时间匹配（偏差≤±2.5%）。
• ​​定量​​：
  • ​​标准曲线法​​：线性范围0.5~100 mg/L，相关系数≥0.99。
  • ​​单点校准​​：样品浓度与标准溶液浓度差需≤30%。
  • ​​计算公式​​：
    • 多点校准：w = /frac{/rho /times V}{m}
    • 单点校准：w = /frac{A /times /rho_s /times V}{A_s /times m}
  • ​​结果表示​​：平行测定均值，保留3位有效数字。

​​8. 精密度要求​​

• 重复性条件下，两次测定结果的绝对差值≤算术平均值的10%。

​​9. 附录A（资料性）​​

• 提供2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷（1 mg/L）的典型液相色谱图（见图A.1），辅助峰识别。

​​10. 其他说明​​

• ​​专利声明​​：标准可能涉及专利，但发布机构不承担识别责任。
• ​​引用标准​​：遵循GB/T 1.1-2020起草规则，引用GB/T 6682对实验用水的要求。

​​总结​​

该标准详细规定了蜂蜜中2-乙酰呋喃-3-葡萄糖苷的HPLC检测方法，涵盖样品处理、仪器参数、定性与定量分析、精密度控制等关键环节，适用于食品安全监测及质量管控。方法具有灵敏度高（检出限0.5 mg/kg）、操作规范性强等特点。