T/CVMA 234-2025 大熊猫输血前交叉配血试验技术规范

​​《大熊猫输血前交叉配血试验技术规范》（T/CVMA 234-2025）主要内容总结​​

​​1. 范围​​

本文件规定了大熊猫输血前交叉配血试验的样本和材料要求、操作方法及结果判定标准，适用于大熊猫输血前的交叉配血操作及结果判定。

​​2. 规范性引用文件​​

无直接引用文件，但遵循GB/T 1.1-2020的起草规则。

​​3. 术语和定义​​

• ​​凝集（Agglutination）​​：抗体与红细胞抗原结合形成的肉眼可见凝集团块。
• ​​滴（Drop）​​：1滴≈50μl，可用50μl替代。
• ​​红细胞悬液（RBC Suspension）​​：2%~5%浓度的红细胞生理盐水悬液。
• ​​交叉配血试验（Cross-matching Test）​​：检测供血者与受血者血液相容性，分主侧（供血红细胞+受血血清）和次侧（供血血清+受血红细胞）试验。
• ​​盐水/抗球蛋白/聚凝胺介质交叉配血​​：分别用于检测天然抗体、IgG类抗体及非直接凝集抗体。
• ​​细胞扣（Cell Clot）​​：离心后黏附于试管底的红细胞团。
• ​​压积红细胞（Hematocrit）​​：离心后去除上清液的红细胞层。

​​4. 样本、试剂、材料与设备​​

• ​​样本要求​​：EDTA抗凝或非抗凝全血，4℃保存≤72小时。
• ​​样本制备​​：
  • ​​压积红细胞​​：1000g离心1分钟，去除上清。
  • ​​红细胞悬液​​：洗涤压积红细胞3次后配制成2%~5%浓度。
  • ​​血清​​：非抗凝全血凝固后离心（1000g, 5分钟），避免溶血或浑浊。
• ​​试剂与设备​​：生理盐水、离心机、恒温水浴箱、显微镜、微柱凝胶卡等。

​​5. 操作方法​​

​​5.1 主侧交叉配血（受血血清+供血红细胞）​​

• ​​盐水介质​​：检测天然抗体，阴性时需进一步试验。
• ​​抗球蛋白介质​​：检测IgG类抗体，37℃孵育30分钟后洗涤加抗球蛋白试剂。
• ​​聚凝胺介质​​：检测非直接凝集抗体，需低离子介质和重悬液步骤。

​​5.2 次侧交叉配血（供血血清+受血红细胞）​​

方法与主侧类似，分盐水、抗球蛋白、聚凝胺三种介质。

​​通用要求​​：

• ​​对照设置​​：需设自身对照和阳性对照。
• ​​特殊处理​​：冷/温抗体需4℃或37℃孵育（≤30分钟）。
• ​​局限性​​：盐水法可能漏检IgG抗体，聚凝胺法易受药物干扰。

​​6. 结果判定​​

• ​​试管法​​：
  • ​​判读标准​​：轻摇后观察凝块脱落情况（表1），分0（阴性）至++++（强阳性）。
  • ​​溶血或显微镜下不规则凝集​​：判为阳性。
• ​​微柱凝胶卡法​​：按厂商标准判读。

​​7. 特殊情况与注意事项​​

• ​​自身对照阳性​​：需排除干扰（如自身抗体、药物影响）后重试。
• ​​聚凝胺法失效​​：可能因肝素等药物或多凝集细胞导致。
• ​​操作误差​​：轻柔摇动试管避免假阳性/阴性，建议平行试验。

​​8. 附录与补充说明​​

• ​​表1 凝集强度判读​​：详细描述从0（无凝集）到++++（单一凝块）的肉眼和显微镜特征。
• ​​红细胞悬液浓度计算​​：压积红细胞体积×0.9后稀释，允许一定误差。

​​文件意义​​

本规范为大熊猫输血安全提供了标准化操作流程，涵盖样本处理、多种配血方法及结果判读，确保输血相容性检测的准确性和可重复性，同时提示不同方法的局限性及应对措施。