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T/HTCMA 083-2022 河南道地药材 红花组织培养育苗技术规程

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资料介绍

以下是针对《T/HTCMA 083-2022 河南道地药材红花组织培养育苗技术规程》的详细内容总结:


​一、标准核心内容​

1. ​​适用范围​

  • 规定红花(Carthamus tinctorius L.)组织培养育苗的 ​​术语定义、设施设备、组织培养流程、温室驯化​​ 等技术要求。
  • 适用于河南省道地药材红花的工厂化育苗。

2. ​​术语与定义​

  • ​道地药材​​:具有地域特色、历史悠久、品质优良的中药材。
  • ​红花​​:菊科经济植物,学名 Carthamus tinctorius L.
  • ​组织培养​​:在无菌条件下,利用红花幼嫩胚根等外植体再生植株的技术。
  • ​愈伤组织诱导培养​​:外植体初代无菌培养阶段。
  • ​诱导分化培养​​:愈伤组织转接至分化培养基形成幼苗的阶段。

​二、设施设备要求​

1. ​​组织培养功能区​

​功能区​ ​设备配置​
洗涤室 洗瓶机、水槽、收纳箱、量瓶架
灭菌室 高压蒸汽灭菌锅、紫外线灯、烘干箱、微孔过滤器
培养基配制室 万分之一电子天平、酸度计、微波炉、冰箱
缓冲室 衣帽柜、风淋装置
无菌接种室 超净工作台、酒精灯、器械消毒器
无菌培养室 培养架、紫外灯、臭氧发生器、温湿度控制器(23~25℃)、光照控制器(3000~5000 lx)

2. ​​温室驯化设施​

  • 温湿度调节装置、光照控制器、灌溉设备、栽培床、穴盘。

​三、组织培养技术流程​

1. ​​外植体制备与灭菌​

  • ​种子处理​​:
    • 精选饱满种子,自来水浸泡24小时。
    • 超净台内灭菌流程:75%乙醇消毒30秒 → 无菌水冲洗3~5次 → 0.1% HgCl₂消毒20分钟 → 无菌水冲洗3~5次。
  • ​外植体取材​​:取萌发后健壮胚根,截取0.5~1 cm芽段。

2. ​​培养基配置​

  • ​基本要求​​:pH值5.8,蔗糖30 g/L,琼脂4 g/L。
  • ​三类培养基成分​​(详见附录A):
    ​成分类型​ ​愈伤组织诱导培养基​ ​分化培养基​ ​生根培养基​
    ​植物激素​ NAA 0.5 mg/L + 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L + 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.02 mg/L + 6-BA 0.02 mg/L
    ​活性炭​ 3000 mg/L
    ​无机盐浓度​ 全量MS 全量MS 减半MS(如NH₄NO₃ 825 mg/L)

3. ​​培养流程​

​阶段​ ​操作要点​
​愈伤组织诱导​ 每10 mL培养基接种1个芽段,培养3周(23~25℃、光照16 h/d、3000~5000 lx)。
​愈伤组织分化​ 切取愈伤组织转接至分化培养基。
​生根培养​ 分化苗转接至生根培养基,培养至根芽齐全(同光照温度条件)。

​四、温室驯化技术​

  1. ​幼苗锻炼​​:
    • ​带瓶锻炼​​:瓶苗移入温室,日光锻炼5~7天(湿度75%~85%、遮光率40%、23~25℃)。
    • ​开瓶锻炼​​:开瓶3~5天,保持基质湿润。
  2. ​移栽操作​​:
    • 洗净根部培养基,农用杀菌剂浸泡处理。
    • 定植于营养土穴盘,喷水保湿。

​五、附录关键信息​

​表A.1 培养基成分表​

​成分​ ​愈伤诱导培养基 (mg/L)​ ​分化培养基 (mg/L)​ ​生根培养基 (mg/L)​
​NH₄NO₃​ 1650 1650 825
​6-BA​ 1.0 3.0 0.02
​NAA​ 0.5 0.1 0.02
​活性炭​ 3000 0 0
​蔗糖​ 30000 30000 30000

​六、标准属性与归口​

  • ​性质​​:推荐性团体标准(非强制)。
  • ​提出单位​​:河南省农业科学院中药材研究所。
  • ​归口单位​​:河南省中药材协会、河南省农学会中药材专业委员会。
  • ​知识产权​​:归属于河南省农业科学院中药材研究所,由其解释并组织实施。

​总结​​:该标准系统规范了红花组织培养的全流程,从外植体灭菌、培养基配方、培养环境控制,到温室驯化移栽,均提供可操作的技术参数,适用于规模化生产优质红花种苗。

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