T/GRM 103-2024 深色有隔内生真菌应用技术规程

ICS 13.020.01
CCS D00/09
中关村绿色矿山产业联盟团体标准
T/GRM 103—2024
深色有隔内生真菌应用技术规程
Technical Specification for Application of Dark Septate Endophytes
2024 - 12 - 23 发布2024 - 12 - 24 实施
中关村绿色矿山产业联盟 发布

目次
前言.................................................................................. II
1 范围................................................................................ 1
2 规范性引用文件...................................................................... 1
3 术语和定义.......................................................................... 1
3.1 深色有隔内生真菌dark septate endophytes ........................................ 1
3.2 生态修复ecological remediation ................................................. 1
3.3 水剂aqueous agent .............................................................. 1
3.4 粉剂powder ..................................................................... 1
3.5 包衣种子coating seeds .......................................................... 1
4 技术要求............................................................................ 1
4.1 产品规格........................................................................ 1
4.2 技术原理........................................................................ 2
4.3 施用方式........................................................................ 2
4.4 施用要求........................................................................ 2
4.5 生物性能........................................................................ 2
5 检验方法............................................................................ 3
5.1 植物根系发育.................................................................... 3
5.2 植物光合作用.................................................................... 3
5.3 植物生长能力.................................................................... 3
5.4 微生物检测...................................................................... 3
5.5 土壤养分检测.................................................................... 3
6 安全与环保要求...................................................................... 3
7 包装、标识、运输和贮存.............................................................. 3
7.1 包装............................................................................ 3
7.2 标识............................................................................ 4
7.3 运输............................................................................ 4
7.4 贮存............................................................................ 4
T/GRM 103—2024
II
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
为使我国矿区生态修复菌剂的应用技术走上科学化，规范化轨道，指导矿区微生物复垦工程建设，
促进矿区生态环境的恢复与可持续发展，特制定《深色有隔内生真菌应用技术规程》标准。本标准主要
规定了深色有隔内生真菌菌剂的范围、术语和定义、技术要求、检验方法、安全与环保要求和包装、标
识、运输和贮存。
本文件由中关村绿色矿山产业联盟提出并归口。
本文件起草单位：中国矿业大学（北京）矿山生态修复研究院、西安科技大学西部矿山生态环境修
复研究院、天山实验室、北京合生元生态环境工程技术有限公司。
本文件主要起草人：毕银丽、彭苏萍、王淑惠、解琳琳、张延旭、王坤、全文智、肖礼、武超、柯
增鸣
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深色有隔内生真菌应用技术规程
1 范围
本标准规定了由深色有隔内生真菌的范围、术语和定义、技术要求、检验方法、安全与环保要求和
包装、标识、运输和贮存。
本标准适用于矿山废弃地改良、矿区复垦与生态恢复、低产田提质、盐碱地改良及其他土壤改良用
途。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/Z 41358-2022 土壤健康综合表征的生物测试方法
GB/Z 41359-2022 土壤质量呼吸曲线法测定土壤微生物区系的丰度和活性
GB/T 42363-2023 土壤质量土壤理化分析样品的预处理
GB/T 42487-2023 土壤质量土壤硝态氮、亚硝态氮和铵态氮的测定氯化钾溶液浸提流动分析法
GB/T 42490-2023土壤质量土壤与生物样品中有机碳含量与碳同位素比值、全氮含量与氮同位素比
值的测定稳定同位素比值质谱法
GB 36600-2018 土壤环境质量建设用地土壤污染风险管控标准（试行）
GB/T 40226-2021环境微生物宏基因组检测高通量测序法
GB/T 41727-2022农用微生物菌剂功能评价技术规程
GB/T 41728-2022 微生物肥料质量安全评价通用准则
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 深色有隔内生真菌dark septate endophytes
一类定殖于宿主植物根表皮、皮层，甚至维管束组织细胞内和细胞间隙，形成深色有隔菌丝和微菌
核特征结构的内生真菌。
3.2 生态修复ecological remediation
在生态学原理指导下，以生物修复为基础，结合各种物理修复、化学修复以及工程技术措施，通过
优化组合，使之达到最佳效果和最低耗费的一种综合的修复方法。
3.3 水剂aqueous agent
深色有隔内生真菌与培养液或水均匀混合在一起的悬浊液制成的一种剂型。
3.4 粉剂powder
深色有隔内生真菌烘干或冻干后粉碎制成的一种剂型。
3.5 包衣种子coating seeds
将深色有隔内生真菌、肥料、保水剂等（或之一）按比例用粘合剂包在种子之外。
4 技术要求
4.1 产品规格
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该产品来自于深色有隔内生真菌发酵培养到生长指数期获得的液体菌剂和固体菌剂。
4.2 技术原理
深色有隔内生真菌具有类似于菌根的生态学功能，可以促进宿主植物矿质营养的吸收，提高宿主生
物胁迫和非生物胁迫抗性。深色有隔内生真菌在世界上所有主要生物群落的大多数分类群中都能寄生于
植物根部。由于深色有隔内生真菌具有无宿主特异性、可纯培养等特征，很容易在野外采集并分离培养
得到应用于植物生长和环境修复。
4.3 施用方式
4.3.1 粉剂拌种
将深色有隔内生真菌粉剂和种子充分混匀，必要时将种子喷湿后混合，即拌即播，拌种后的种子当
天用完，适用于条播、撒播或大面积机播。
4.3.2 水剂拌种
深色有隔内生真菌液体菌剂和种子充分混匀，至种子相互间不粘连为宜，拌种后的种子当天用完，
适用于条播、撒播或大面积机播。
4.3.3 包衣种子
将深色有隔内生真菌与肥料、保水剂等不影响深色有隔内生真菌活性的材料用粘合剂混合包裹在种
子表面的种子产品，可直接播种。
4.3.4 灌根法
将深色有隔内生真菌液体菌剂或粉剂直接施于植物根部，促进植物根系发育。这种方法适用于于低
产田提质、灌溉条件较好的矿区。
4.3.5 叶面涂抹法
将深色有隔内生真菌液体菌剂用刷子，均匀涂抹在植物叶片表面，宜少量多次涂抹，有利于促进养
分快速吸收。
4.3.6 与其它内生真菌混施法
将深色有隔内生真菌与菌根真菌混拌匀后施入植物根部，为内生真菌提供良好生存环境，便于内生
真菌与植物根系更好共生，加速生态快速稳定建植与稳定生长发育。
4.3.7 与肥料混施法
将深色有隔内生真菌与有机肥或无机肥混合后施用，利用其保水保肥特性，提高养分利用率和土壤
结构的稳定性。该方法适用于需同步提高肥力的低产田提质和矿山废弃地改良。
4.4 施用要求
4.4.1 应根据需要确定深色有隔内生真菌的施用时期、次数及数量
参考当地物候期，可应用于植被种植前的基肥，也可应用于植物生长期的追肥。根据不同适合的施
用方式确定用量。
4.4.2 应避免在高温或强降雨天施用
4.5 生物性能
4.5.1 促进植物根系发育
深色有隔内生真菌能够提高植物根体积和根系活力，改善根系结构和促进养分吸收。
4.5.2 提高植物养分吸收
深色有隔内生真菌可以向宿主植物提供氮、磷等养分，提高植物养分吸收能力。
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4.5.3 提高植物光合作用效率
深色有隔内生真菌作为叶面肥，有利于提高植物叶片蒸腾速率、净光合速率、胞间二氧化碳浓度和
气孔导度。
4.5.4 提高植物水分利用效率
深色有隔内生真菌可以促进植物吸收深层土壤水分，提高水分利用效率。
4.5.5 改善土壤养分循环
深色有隔内生真菌可以提高土壤酶活性，促进土壤中营养元素的转化与循环，增加土壤养分的有效
性。
4.5.6 促进土壤微生物活性
深色有隔内生真菌能够促进土壤中微生物群落的生长和活性，从而有助于提高土壤的生物学活性，
提升土壤肥力，增加菌群的生物多样性。
5 检验方法
5.1 植物根系发育
埋设根管监测植物根系发育情况，测定指标包括根直径、根尖数、细根长。
5.2 植物光合作用
测定植物叶绿素含量，参照GB/T 41727-2022农用微生物菌剂功能评价技术规程执行；通过植物光
合仪监测植物光合作用参数，包括蒸腾速率、净光合速率、胞间CO2浓度和气孔导度。
5.3 植物生长能力
测定植物盖度、植株干重、根干重和根冠比，参照GB/T 41727-2022农用微生物菌剂功能评价技术
规程执行。
5.4 微生物检测
测定土壤有益微生物种群结构与数量，参照GB/T 40226-2021环境微生物宏基因组检测高通量测序
法的规定执行。参照GB/Z 41358-2022 土壤健康综合表征的生物测试方法、GB/Z 41359-2022 土壤质量
呼吸曲线法测定土壤微生物区系的丰度和活性。
5.5 土壤养分检测
参照GB/T 42363-2023 土壤质量土壤理化分析样品的预处理，GB/T 42487-2023 土壤质量土壤硝
态氮、亚硝态氮和铵态氮的测定氯化钾溶液浸提流动分析法和GB/T 42490-2023土壤质量土壤与生物
样品中有机碳含量与碳同位素比值、全氮含量与氮同位素比值的测定、稳定同位素比值质谱法。
6 安全与环保要求
符合环境保护相关法规要，不含有害病原微生物或重金属，符合土壤安全标准，参考GB/T
41728-2022 微生物肥料质量安全评价通用准则。
7 包装、标识、运输和贮存
7.1 包装
根据不同产品剂型选择适当的包装材料、容器、形式和方法，以满足菌剂产品包装的基本要求。产
品包装中应有产品使用说明书，在使用说明书中标明使用范围、方法，用量及注意事项等内容。
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液态菌剂可使用无菌塑料瓶灌装；粉剂产品和包衣种子可使用无菌塑料管包装，胶囊菌剂可装在无
菌瓶内，内置干燥剂防潮。
7.2 标识
产品外包装需明确标注生产日期、保质期、批次、成分含量、贮存条件及适用领域。
7.3 运输
运输过程中有遮盖物，防止雨淋、日晒及高温。保证产品轻装轻卸，避免包装破损。严禁与对微生
物菌剂有毒、有害的其他物品混装、混运。
7.4 贮存
液态菌剂应冷藏贮存（2-8℃）。粉剂、胶囊型和包衣种子产品应贮存在阴凉、干燥、通风的库房
内，应避免高温、高湿等不良条件的影响。